讯阳文艺网糖皮质激素受体
本文通过对米非司酮的结构修饰发现了一种具有高选择性的米非司酮衍生物，通过在米菲司酮C10位上引入甲基从而达到对雄激素受体（AR）和孕激素受体（PR）具有较高的选择性，衍生物15（OP-3633）作为糖皮质激素受体（GR）的拮抗剂，其改善了对AR和PR的选择性，改善了细胞色素P450的抑制谱，显著的改善了药代动力学，且在GR的阳性细胞HCC-1806的三阴性异种乳腺癌模型中，抑制了GR的转录活性。
米非司酮（1）是传统的GR拮抗剂（IC50=3.26±0.62 nM），但是其除了对GR具有良好的拮抗作用外，其AR具有较高的激动作用（EC50=11.9 nM）和对PR也具有较高的拮抗作用（IC50=0.4±0.2 nM），对GR的选择性并不好,如图 1所示。该课题组以先前制备的化合物2为基础，对其进行修饰，合成一种对GR具有高选择性的化合物。
图 1 米菲司酮（1）和化合物2对 AR ,GR,PR的双荧光素酶报告分析
该课题组以2为基础，首先将B环的双键打开得到了3，如表 1，3相对于2其增加了对GR和PR的拮抗作用，但是对AR的激动作用也有所加强。
表 1 C21取代苯的修饰
在3的基础上，改变C环取代苯上的取代基得到4-8， 4，5，7相对于化合物2增强了对GR和PR的拮抗作用，而6对GR和PR的拮抗作用均有所减弱。4，5，6对AR的激动作用有所减弱。8是改变了炔的末端，该衍生物增强了对GR的拮抗作用的同时减弱对PR的拮抗作用和对AR的激动作用。
表 2 C17取代炔的修饰
有文献报道，在米菲司酮的C10上引入甲基可以使A环略微向下弯曲，于是在C10上引入甲基并且对炔上的取代基进行了替换。合成了9-15，该类衍生物明显减弱了对PR的拮抗作用以及对AR的激动作用，但对GR仍有相对较好的拮抗作用，其中化合物9，11，15在对GR有好的拮抗作用，对AR的激动作用弱，对GR的拮抗作用弱。
图 2 衍生物15的旋转示意图
图 2是他们构建的C9-C11-C21-C22的旋转示意图，在 C9-C11引入甲基的确会影响苯环的旋转，而且甲基的引入对A,B,C,D环的形状也有一定的影响。
图 3 米菲司酮（1）和 衍生物15 的X射线结构图
图 3是米菲司酮和化合物15的X射线结构图，米菲司酮C9-C11-C21-C22的扭转角为15.4°，而化合物15的扭转角为38.4°，这种构象的变化会导致化合物和PR发生额外的空间冲突，从而提高对GR的选择性。
表 3 C21取代苯的修饰
由表 3可知，化合物16-21对GR的选择性并没有较大的改善。
综上21个化合物中，化合物9，11，15对GR具有较好的拮抗作用的同时，对AR和PR存在较好的选择性。
于是对化合物9，11，15进行了CYR的抑制分析，如表 4，表 5所示，化合物15相比于化合物9和11对CYR3A4和CYR2C8的抑制率比较低。在和化合物1，2的比较中，2的抑制效果明显好于1，化合物15的抑制效果虽然比1，2差，但其具有一定的潜力。
接下来对1，2，15进行了糖皮质激素受体竞争试验的体外分析，化合物15的价效和2相当但均低于1，如 图 4所示。
图 4 化合物 1，2，15进行了糖皮质激素受体竞争试验
图 5是GR的共激活剂的相互作用试验，化合物2是化合物15的2倍，化合物1是化合物15的4.5倍
图 5 GR的共激活剂的相互作用试验
为了确认15是否适合临床开发，进行了大鼠，狗，小型猪的药代动力学表征实验，如表 6所示， 15和1，2有相当的代谢率和口服利用率，比1高10倍，比2高2倍。
表 6 化合物1，2，15 的药代动力学数据
表 7是在狗和小型猪中的药代动力学数据，从表中可以看到化合物15在狗和小型猪中具有中度代谢率和良好的口服利用率。
表 7 化合物15在狗和小型猪中的药代动力学数据
表 8是化合物1和15在不同pH的溶解度，在弱酸和弱碱性下具有较好的溶解度
表 8 化合物1和15的溶解度表
接下来又做了化合物15的药代动力学实验，如图 6所示。
图 6 化合物15 的药代动力学研究
图 6的（A）探究了衍生物15对GR转录活性的影响，由图我们可以明显的看出在不加化合物15的情况下，FKBP5的含量明显的上升，3个小时是刚开始的4倍，6小时候是刚开的3倍，在加了化合物15之后，3小时和6小时后，均维持在初始水平。图B是血药浓度曲线，由图可知，在1小时左右，化合物15的血药浓度维持在0.4μ M左右,表明药物在体内能够维持一定的水平，具有一定的生物利用率。
基于化合物15在HCC1806异种移植肿瘤中有2倍安全裕度，进行化合物有15口服（灌胃）实验以确定其潜在毒性，在为期14天，每天250 mg·kg-1·day-1的实验中，研究表明，在整个研究期间，雌性大鼠对化合物15的耐受性良好，临床没有观察到化合物15对平均体重或食物消耗量变化的影响。重要的是，在卵巢或子宫重量中未观察到明显的和化合物15相关效应。基于轻度至轻度的严重程度以及与临床病理学缺乏相关的提示器官功能障碍，认为和化合物15的相关发现为非不良反应。
总结
本文通过在米菲司酮的C10引入甲基在进行修饰得到衍生物15，经测定衍生物15对GR具有良好的选择性和出色的生物利用度。通过单晶结构的叠加可以发现化合物15和米菲司酮的结构差异。此外，在HCC1806异种移植肿瘤中，衍生物15对皮质醇的诱导的GR表达具有好的抑制效果。在一项为期14天的大鼠探索性毒理学研究中，对15的口服剂给药耐受性良好，在子宫和卵巢中没有PR抑制相关作用的迹象。GR具有好的拮抗效力，优异的选择性和好的细胞色素P450抑制谱以及合适的药代动力学特征，使衍生物15成为治疗患有癌症的候选药物。
