讯阳文艺网引物的长度一般为多少？
一般引物长度为18~30碱基。总的说来，决定引物退火温度（Tm值）重要的因素就是引物的长度。有以下公式可以用于粗略计算引物的退火温度。
在引物长度小于20bp时：[4(G+C)+2(A+T)]-5℃
在引物长度大于20bp时：62.3℃+0.41℃(%G-C)-500/length-5℃
另外有许多软件也可以对退火温度进行计算，其计算原理会各有不同，因此有时计算出的数值可能会有少量差距。为了优化PCR反应，使用确保退火温度不低于54℃的短的引物可获得好的效率和特异性。
延伸阅读
ssr引物设计原则和注意事项？
引物自身及引物之间不应存在互补序列。连续互补的碱基应该要少于4 个。引物
应使其△G 值不要太高，△G 值越大，则双链越稳定。
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引物长度和GC 含量要适中。引物长度大概为18~28 bp，但不应大于38 bp，引物过短会影响到扩增的特异性，太长的话其延伸温度将会大于74 ℃，不利Taq 酶的催化反应。若扩增产物为4~5 kb，引物最好不要少于24bp；如果目的产物≤500 bp，引物长度只要16~18 bp 即可。上下游引物间的Tm 值的差值最好在10 ℃以内，GC 含量最好是40%~60%。
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3′端不应该存在相似性高的序列，否则容易导致错配。3′端不能有多于3 个连续的G 或C，要不然引物错配会在GC 富集区。
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引物3′端不能修饰，5′端可以修饰，还尽量要避开密码子第3 位。同时要注意选择3′端△G 值相对较低，5′端和中间△G 值较高的引物。
PCR过程，引物？
PCR的技术的主要步骤及PCR引物设计的一般原则分述如下： PCR的技术的主要步骤：
1、DNA变性：（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA。
2、退火：（60℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。
3、延伸：（70℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dNTP为原料，从引物的3′端开始以从5′→3′端的方向延伸，合成与模板互补的DNA链。
每一循环经过变性、退火和延伸，DNA含量即增加一倍。
现在有些PCR因为扩增区很短，即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成，因此可以改为两步法，即退火和延伸同时在60℃-65℃间进行，以减少一次升降温过程，提高了反应速度。 2、引物设计的基本原则 1、引物长度：15-30bp，常用为20bp左右。
2、引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C 过多易出现非特异条带。
ATGC最好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列参照。
3、引物内部不应出现互补序列。
4、两个引物之间不应存在互补序列，尤其是避免3 ′端的互补重叠。
5、引物与非特异扩增区的序列的同源性不要超过70%，引物3′末端连续8个碱基在待扩增区以外不能有完全互补序列，否则易导致非特异性扩增。
6、引物3‘端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，最佳选择是G和C。
7、引物的5 ′端可以修饰。
如附加限制酶位点，引入突变位点，用生物素、荧光物质、地高辛标记，加入其它短序列，包括起始密码子、终止密码子等。
pcr产物大小与引物大小的关系？
PCR 扩增序列长度和设计引物长度没有太多必然联系(用 15bp 引物扩增 9K+的序列也 没有任何问题) ,使 Tm 值一定小于 72°C,1、引物长度一般为15-30bp,常用的为18-27bp,但不能大于38bp; 2、引物度GC含量一般为40%-60%,以45-55%为宜,上下游引物GC含量和Tm值。
pcr引物产物长度控制在多长合适？
一般而言为了确保引物与模板专一性结合，引物长度以18bps以上为宜，最短最好不要低于15bps。
但是如果引物过长，则引物内部容易形成二级结构，引物之间也容易形成二级结构，这样反而会影响pcr扩增的效果。
因此，一般普通pcr引物以16—25bps长度最好，既最大限度确保扩增特异性，有尽可能防止引物内部或引物之间形成二级结构，影响扩增效果。。
pcr反应反应引物设计原则是什么？
. 引物最好在模板cDNA的保守区内设计。
2. 引物长度一般在15~30碱基之间。
3. 引物GC含量在40%~60%之间，Tm值最好接近72℃。
4. 引物3′端要避开密码子的第3位。
5. 引物3′端不能选择A，最好选择T。
6. 碱基要随机分布。
7. 引物自身及引物之间不应存在互补序列。
8. 引物5′端和中间△G值应该相对较高，而3′端△G值较低。
9. 引物的5′端可以修饰，而3′端不可修饰。
10. 扩增产物的单链不能形成二级结构。11. 引物应具有特异性。
pcr反应名词解释？
PCR 反应指的是主要由寡核苷酸(引物)、4 种dNTP、Taq DNA 聚合酶、靶序列DNA 和PCR 反应缓冲液体系组成的反应。
设计PCR 反应时要做到以下几个方面：
(1)引物长度- 一般15~ 30碱基，过短则特异性低; 过长则会引起引物间的退火而影响有效扩增。
(2) 避免内部二级结构，避免序列内有较长的回文结构，使引物自身不能形成发夹结构。
(3) G/C 和A/T 碱基均匀分布，G/C 含量在45%~ 55% 之间，引物碱基序列尽可能选择碱基随机分布，避免嘌呤、嘧啶的连续排列。
(4) 要避免两个引物间特别是3′ 末端DNA 序列互补以及同一引物自身3′ 末端的序列互补，使它们不能形成引物二聚体或发卡结构。
设计引物注意事项？
1. 引物的长度一般为15-30 bp，常用的是18-27 (22)bp，但不应大于38，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于Taq DNA聚合酶进行反应。
2. 碱基要随机分布。引物序列在模板内应当没有相似性较高，尤其是3’端相似性较高的序列，否则容易导致错误引发（False priming）。降低引物与模板相似性的一种方法是，引物中四种碱基的分布最好是随机的，不要有聚嘌呤或聚嘧啶的存在。尤其3′端不应超过3个连续的G或C，如GGG或CCC，因这样会使引物在GC富集序列区错误引发。
3. 引物3’端的末位碱基对Taq酶的DNA合成效率有较大的影响。不同的末位碱基在错配位置导致不同的扩增效率，末位碱基为A的错配效率明显高于其他3个碱基，因此应当避免在引物的3’端使用碱基A。而当末位链为T时，错配的引发效率大大降低，G、C错配的引发效率介于A、T之间，所以3′端最好选择T。
“引物”的具体介绍是什么？
RNA引物(RNA primer)，是一小段单链DNA或RNA，长度大约为10个（5~15个）核苷酸,作为DNA复制的起始点，存在于自然中生物的DNA复制，引物（DNA，RNA的） primer 指在核酸合成反应时，作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链，在引物的3′-OH上，核苷酸以二酯链形式进行合成，因此引物的3′-OH，必须是游离的。
