细胞培养液怎么贮存?
细胞培养液的储存方法:
细胞培养液的储存条件一般为2~8℃、密闭、避光保存,但要注意如下几点:
(1)过滤后的完全培养液,即添加了血清、谷氨酰胺、抗生素等的培养液要尽快使用,一般在2~3周内使用完。
(2)灭菌后的未加L-谷氨酰胺等添加剂的培养基溶液,一般可在4℃保存6~9个月,也可冷冻保存,用时解冻。
(3)高压除菌后的培养基应置4℃保存,不能因为其可耐受高温而忽略储存温度。
(4)添加了谷氨酰胺的培养液放置2周后,要补加和原来同样量的谷氨酰胺,但这样并不能消除谷氨酰胺降解产生的游离氨,建议配制好的培养液尽快使用。
(5)添加某些生长因子、激素等添加物,可能会改变培养液的储存条件,比如温度、时间等方面的要求。
延伸阅读
细胞培养液里的细胞怎么计算细胞个数?
实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。具体操作:
1.将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。
2.将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3.计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104说明:公式中除以4,因为计数了4个大格的细胞数。公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为:1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3而1ml=1000mm3(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液)
细胞培养液有哪几种类型?
培养液是既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质,也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。培养基的种类很多,按其物质状态分为半固体培养基和液体培养基两类;按其来源分为合成培养基和天然培养基。
1. 天然培养基:使用最普遍的天然培养基是血清,基本以小牛血清最普遍。血清由于含有多种细胞生长因子、促贴附因子及其多活性物质。与合志培养基合用,能使细胞硕利增殖生长。常见使用最为 5-20%。
2. 合成培养基:合成培养基是根据细胞所需物质的种类和数量严格配制而成的。内含碳水化合物、氨基酸、脂类、无机盐、维生素、微量无素和细胞生长因子等。单独使用细胞虽有生存但不能很好的生长增殖。
干细胞的培养液成分与普通的有什么区别?
动物细胞培养液:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清或血浆。
植物组织培养液的成分:水、无机盐、蔗糖、植物激素(生长素,细胞分裂素)等。 干细胞对培养条件要求较高,常用的胚胎肝细胞培养基有mTeSR 1培养基,主要成分有: DMEM、bFGF,EGF、血清、双抗、LIF、谷氨酰胺、二巯基乙醇、非必需氨基酸等
细胞培养过程中,培养液为什么会变酸?
1: 细胞生长旺盛,代谢活跃,产生大量乳酸和CO2。
2:缓冲体系不足(如果是在CO2培养箱中,拧得太松,缓冲不强的话确实有这个问题)
①在细胞生长过程中,产生细胞代谢产物乳酸,乳酸蓄积,pH值通常会下降;
②培养瓶盖拧得过紧; —细胞代谢产生的CO2无法溢出,溶解于培养基中导致酸性变强。
③NaHCO3缓冲系统缓冲能力不够;
④细菌、酵母或真菌污染等。